fa تاثیر محیط کشت پایه، سرم جنین گاو (FBS) و دما بر کشت سلول های فولیکولی تاسماهی استرلیاد Acipenser ruthenus Linnaeus, 1758 تخصصي Special پژوهشي Research در این تحقیق پس از بیهوش نمودن یک عدد تاسماهی استرلیاد ماده پرورشی 6 ساله به وزن 729 گرم و طول 47/3 سانتی متر و با استفاده از پودر گل میخک (0/4 گرم در لیتر)، قسمتی از تخمدان خارج شد. تخمک ها از یکدیگر جدا شدند و پس از شستشو با بافر PBS استریل حاوی آنتی بیوتیک ها، سلول های فولیکولی از طریق تیمار تخمک ها با Trypsin-EDTA درصد 0/25 حل شده در PBS عاری از یون های کلسیم و منیزیوم جدا شدند و در محیط کشت L-15 دارای 20 درصد سرم جنین گاو (FBS) و آنتی بیوتیک ها در دمای 22 درجه سانتی گراد کشت داده شدند (clls/ml 106&times;1/25). پس از دوازده روز، زمانی که به مقدار کافی یک لایه سلولی روی کف فلاسک کشت تشکیل شد، سلول ها با استفاده از Trypsin-EDTA&nbsp;درصد&nbsp;0/25 از کف فلاسک جدا شدند و با PBS حاوی آنتی بیوتیک ها&nbsp; شستشو و کشت داده شدند. در این تحقیق از محیط کشت های&nbsp;L-15، DMEM/F12&nbsp; و M199، غلظت های 10، 15 و 20 درصد سرم جنین گاو و دماهای 20، 22 و 25 درجه‌ سانتیگراد استفاده شد. سلول ها در محیط کشت L-15&nbsp; تکثیر خوبی را نشان دادند ولی در محیط کشت های دیگر تکثیری مشاهده نشد و در دماهای 20 و 22 درجه سانتی گراد توانستند تکثیر یابند که دمای 22 درجه ایده‌آل بود. همچنین میزان تکثیر سلول های فولیکولی زمانی که مقدار FBS محیط کشت از 10 درصد به 20 درصد رسید، افزایش یافت. بهترین تکثیر در غلظت 20 درصد FBS مشاهده شد. بیشترین تکثیر سلولی در محیط کشت L-15 دارای 20 درصد FBS و دمای انکوباسیون 22 درجه سانتیگراد بدست آمد.<br> <p dir="rtl"></p><p dir="rtl"></p> In the present study, a piece of the ovary of a 6 years old female Sterlet sturgeon (A. ruthenus), a farmed fish (729 g and 47.3 cm), was removed after anaesthetizing with clove carpel powder (0.4 g/lit). Ovarian follicles were isolated from each other and were washed using sterile phosphate-buffered saline (PBS) containing antibiotics. Follicular cells were then separated by treating oocytes with 0.25% Trypsin-EDTA in Ca2+ and Mg2+ free PBS and were cultured in medium L-15 supplemented with 20% FBS at 22&deg;C (1.25&times;106cells/ml). After twelve days, when confluent monolayer cells covered the bottom surface of the flask, the cells were dislodged by Trypsin-EDTA solution (0.25%), and were then washed with PBS containing antibiotics and sub-cultured. In the experiments, ovarian follicular cell were cultured in L-15, DMEM/F12 and M199 media, 10%, 15% and 20% of FBS, and were incubated at 20&deg;C, 22&deg;C and 25&deg;C. Cells in L-15 showed better growth but no cell growth observed in the other media. The cells could grow at temperature between 20&deg;C and 22&deg;C, and the results showed that the optimum temperature for cell growth was 22&deg;C.&nbsp; In addition, the growth rate of follicular cells increased when the FBS proportion increased from 10% to 20%, with the optimal growth at the concentrations of 20% FBS. Most proliferation of cells obtained when the L-15 medium was supplemented with 20% FBS and the incubation temperature was 22&deg;C. The most proliferation of cells obtained in L-15 medium with 20% FBS at 22&deg;C.&nbsp;<p></p> A. ruthenus , سرم جنین گاو (FBS), سلول های فولیکولی, L-15 A. ruthenus, Fetal Bovine Serum (FBS), Follicular cells, L-15 115 132 http://jair.gonbad.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-286-1&slc_lang=fa&sid=1 Mohammad Reza Nowruzfashkhami محمدرضا نوروزفشخامی Nowruzfashkhami@yahoo.com 10031947532846003697 10031947532846003697 Yes Mohammad Sudagar محمد سوداگر sudagar_M@Yahoo.com 10031947532846003698 10031947532846003698 No Mahmoud Bahmani محمود بهمنی mahmoudbahmani@ymail.com 10031947532846003699 10031947532846003699 No negin Salamat نگین سلامات salamatnegin@gmail.com 10031947532846003700 10031947532846003700 No Mohammad Mazandrani محمد مازندرانی mazandarani57@gmail.com 10031947532846003701 10031947532846003701 No