مطالعه حاضر به‌منظور بررسی پتانسیل استفاده از پودر بذر گیاه استبرق (Calotropis procera) در جیره غذایی ماهی قزل‌آلای رنگین‌کمان (Oncorhynchus mykiss) در پنج سطح ۱، ۲، ۳، ۴ و ۵ درصد به‌علاوه شاهد (صفر درصد) در قالب طرح کاملاً تصادفی در سه تکرار انجام شد. جهت انجام آزمایش ۳۶۰۰ قطعه بچه ماهی قزل‌آلای رنگین‌کمان (۶۴/۳ ± ۵/۱۱ گرم) در ۱۸ عدد حوضچه تقسیم شدند و پس از یک دوره سازگاری دو هفته­ای به مدت ۵۶ روز با شش جیره آزمایشی تغذیه شدند. شاخص‌های رشد، کبدی، امعاء و احشاء کارایی تغذیه به همراه ترکیب شیمیایی لاشه، بقا و ضریب تبدیل غذایی و میکروبیوتای روده مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج نشان داد افزایش میزان پودر بذر استبرق در جیره غذایی ماهیان تا سطح ۴ درصد موجب افزایش معنی­دار رشد ویژه و تعداد باکتری­های اسیدلاکتیک روده نسبت به تیمار شاهد گردید (۰۵/۰P<). نسبت کارآئی پروتئین با افزایش سطح پودر بذر استبرق به میزان ۳ تا ۵ درصد تفاوت آماری معنی­داری را با تیمار شاهد نشان داد ولی تفاوت معنی­داری بین گروه­های آزمایشی وجود نداشت. همچنین میزان بقا، ضریب تبدیل غذایی، شاخص کبدی و شاخص امعا و احشا به ترتیب در تیمارهای دارای سطوح ۲، ۳، ۴ و ۵ درصد پودر بذر استبرق در بهترین وضعیت خود قرار گرفتند (۰۵/۰P<). نتایج نشان داد که استفاده از حداکثر ۳ درصد پودر بذر استبرق به‌عنوان یک افزودنی غذایی گیاهی می‌تواند گزینه مناسبی جهت استفاده در جیره قزل آلای رنگین کمان باشد.